原癌基因USP22启动子的克隆及转录活性分析

 目的克隆原癌基因USP22部分启动子序列,探讨其转录活性。方法应用cDNA 5忆末端快速扩增（5'RACE）方法定位
USP22基因转录起始点;在此基础上针对其5'端非编码区处包括转录起始点在内的-2 828~+52片段进行PCR扩增,产物克隆
入荧光素酶表达载体pGL3-Basic。重组质粒与内参质粒pRL-TK共转染HepG2 与Hela 细胞,双荧光素酶活性检测确定其转录
活性。结果成功确定USP22基因转录起始位点,酶切及测序结果证实USP22基因5'端非编码区2 880 bp 序列正确插入到荧
光素酶报告基因载体pGL3-Basic。重组质粒pGL3-USP22 promoter 转染HepG2 细胞和Hela 细胞后,检测到荧光素酶的高表达
（ P<0.05）。结论成功构建具有转录活性的USP22启动子片段,为进一步研究USP22表达调控机制奠定基础。     

抗结核治疗中预防应用保肝药临床试验的中文文献系统评价

我国结核病负担较高,每年仅新发现的初复治病例即达98万[1],加上原患未治愈者,每年接受治疗的病例超过100万.抗结核治疗使用的一、二线药物均可引起不良反应,其中影响最大且发病率较高的为肝损害[2].     

蜡样芽孢杆菌总蛋白双向电泳方法的建立和优化

目的探索建立有效的蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)蛋白质组双向电泳体系,为进一步揭示其促进氧化葡萄糖酸杆菌(Gluconobacter oxydans)产酸的作用机制奠定基础。方法以培养的B.cereus为材料,比较蛋白质制备超声破壁时间、新型细胞裂解液、pH梯度和不同上样量对B.cereus蛋白双向电泳结果的影响。结果与结论采用15 min超声破壁提取B.cereus总蛋白,选用新型蛋白质裂解,用长24 cm、pH 4～7的IPG胶条,采用80μg上样量进行等电聚焦,于60 V 15 min、120 V 6 h条件下进行SDS-PAGE垂直电泳,可以获得背景清晰、重复性好的双向电泳图谱,建立一套用于B.cereus蛋白质组分析的双向电泳方法。     

甘草提取物与氯硝柳胺联合灭螺机制研究

目的 探索甘草提取物与氯硝柳胺联合用药的灭螺机制。方法 采用室内浸杀法,以氯硝柳胺（Nic）、甘草提取物（GE）、GE+Nic浸泡钉螺24、48 h后,以水养法检测存活情况后,选活螺解剖,分离肝脏后观察不同药物对钉螺肝脏蛋白质、糖原水平的影响。利用离体钉螺平滑肌实验方法观察上述不同药物对钉螺足跖平滑肌收缩活动的影响。结果 甘草提取物对钉螺肝脏的蛋白质及糖原水平并无显著影响（P均 > 0.05）,但能显著抑制钉螺足跖平滑肌的收缩,降低收缩频率（P均 < 0.05）;氯硝柳胺能显著降低钉螺肝脏的蛋白质及糖原水平（P均 < 0.05）,且可增强钉螺足跖平滑肌的收缩强度和收缩频率（P均 < 0.05）;甘草提取物与氯硝柳胺联用后能进一步降低钉螺肝脏的蛋白质及糖原水平,且能够抑制钉螺足跖平滑肌的收缩,降低收缩频率（P均 < 0.05）。结论 甘草提取物与氯硝柳胺联用能加速对钉螺肝脏的损伤,同时可抑制其足跖平滑肌的活动,增加药物接触时间,达到灭螺增效作用。